Иммуноферментный анализ крови

Когда назначается иммуноферментный анализ крови

Существует множество показаний для проведения ИФА диагностики. Наиболее распространенными целями данного обследования являются:

1. Диагностика инфекционных заболеваний (вирусные гепатиты, ВИЧ, ЦМВ, ВЭБ, герпес, ветряная оспа, хеликобактер, заболевания передающиеся половым путем, токсоплазмоз, краснуха, корь и многие другие).
2. Отслеживание эффективности вакцинации (наиболее актуальным является оценка титра антител к столбняку у лиц, получивших травму, с целью решения вопроса о введении профилактической прививки и/или анатоксина).
3. Общая оценка показателей иммунитета, диагностика некоторых аутоиммунных патологий (системной красной волчанки, гломерулонефрита, тиреоидита).
4. Выявление некоторых онкомаркеров (ФНО, РЭА, ПСА).

Также с помощью иммуноферментного анализа определяется концентрация тестостерона, пролактина, прогестерона, ТТГ и других гормонов.

Особенности проведения исследования 

Материалом для исследования чаще всего служит сыворотка крови. Для этого в лаборатории берут венозную кровь. Для получения достоверного результата, забор биоматериала следует проводить утром натощак после 8-10 часового голодания. Это необходимо для того, чтобы кровь не свернулась, а плазма не стала мутной.

В дальнейшем из крови с помощью центрифугирования удаляются форменные элементы, затрудняющие диагностику (эритроциты, тромбоциты, лейкоциты), и проводят непосредственно ИФА анализ. При нем в полученный образец добавляется небольшое количество специфических антигенов. Полученная положительная реакция говорит о присутствии инфекции в организме или наличии иммунитета к ней.

Материалом для исследования также могут служить: ликвор, слезная жидкость отделяемое из глаз, урогенитальные и цервикальные мазки, околоплодные воды.

Срок выполнения анализа в среднем составляет 1-2 суток. При необходимости быстрого получения ответа в случае подозрении на некоторые опасные патологии, ИФА может быть выполнен в течении 2-3 часов.

Интерпретация анализа 

Расшифровкой полученных результатов, когда сдан иммуноферментный анализ крови, должен заниматься лечащий врач, оценивая их в комплексе с клинической картиной болезни и другими методами диагностики (общий и биохимический анализ крови, полимеразная цепная реакция и т. д.)

Результаты могут быть следующими:

• Положительный IgM говорит об остром течении инфекционного заболевания. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии болезни (организм не встречался с возбудителем), так и о хронизации процесса или выздоровлении. Также отрицательный результат может говорить об отсутствии иммунного ответа (у лиц с иммунодефицитными состояниями, после трансплантации органов и костного мозга, принимающих иммуносупрессию, химиотерапевтические препараты).
• Наличие IgA при отсутствии IgM обычно говорит о скрытой, бессимптомной инфекции. Либо о том, что с момента заражения прошло 1-2 суток и специфические антитела класса М не успели выработаться.
• Положительные результаты IgM и IgA одновременно — свидетельствует о разгаре острой фазы заболевания.
• Появление в крови IgG к инфекционному агенту говорит о переходе патологии в хроническую стадию, либо о выздоровлении и выработке естественного (а в случае вакцинации искусственного) иммунитета к патогену.

С целью уточнения диагноза при отрицательном или сомнительном результате первого анализа, при наличии явной клиники инфекционного процесса, повторить исследование рекомендуется спустя 14 суток, т. к. спустя данный промежуток времени в большинстве случаев организм успевает выработать достаточное количество антител.

Реклама партнеров

Когда нужна биохимия

Покажет ли биохимический анализ крови коронавирус – спорный вопрос. Однако БАК назначается всем пациентам с тяжелыми респираторными инфекциями для оценки сохранности функций внутренних органов: сердца, почек, печени. Это помогает оценить тяжесть болезни, подобрать необходимый комплекс лечебных мероприятий.

Из биохимических исследований, как правило, обязательны: уровень креатинина, мочевины, что дает возможность оценить функцию почек, АлАт, АсАт, билирубина – помогает увидеть сохранность печени.

О присоединение бактериальной флоры, риске абсцедирования, сепсиса говорит высокий С-реактивный белок, прокальцитонин. Обязательно смотрят и ферменты сердечной мышцы.

Сопутствующие заболевания, подозрение на осложнения расширяют план обследования, рекомендуя не только биохимию, но и:

• состав газов крови;
• уровень молочной кислоты, ферритина;
• коагулограмму;
• интерлейкины.

Как проводится иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ, ИФА, проводится путем исследования образца забранной крови. На поверхность предварительно подготовленной специальной планшетки помещают небольшое количество сыворотки крови и очищенного антигена. Соединяя их, наблюдают за происхождением реакции в микроскоп. Антиген и антитело одного вида образует комплекс. Для диагностики его образования проводят дополнительное окрашивание. По интенсивности произошедшего окрашивания делают выводы относительно концентрации иммуноглобулинов в образце сыворотки крови пациента.

Анализ методом ИФА (что это такое, вы уже знаете) чувствителен даже к небольшому количеству иммуноглобулинов, обладает высокой специфичностью. В результате врачи могут с его помощью проводить точную дифференциальную диагностику заболеваний со схожей клинической картиной. Сама процедура анализа длится недолго, поэтому результат исследования можно узнать в тот же день. При необходимости срочной диагностики получить ответ можно спустя 2–3 часа с момента забора крови.

Иммуноферментный анализ крови – подготовка

Метод иммуноферментного анализа перед его проведением требует от пациента некоторой подготовки. В качестве исследуемого материала выступает венозная кровь. Забор ее осуществляется исключительно в утренние часы, натощак. Перед прохождением процедуры пациенту требуется избегать эмоциональных перегрузок, стрессовых ситуаций, исключить физические нагрузки. Для получения объективных результатов исследования перед тем, как сдавать анализ ИФА на хламидии и другие инфекции необходимо:

1. За сутки до анализа из рациона исключают жирные блюда, копчености и алкоголь.
2. Перед исследованием не курить.
3. Последний прием пищи должен происходить накануне анализа с интервалом не менее 8 часов до предполагаемого времени исследования.

Иммуноферментный анализ – забор материала

Анализ методом ИФА предполагает забор венозной крови в качестве биоматериала для исследования. Осуществляется процедура в условиях лаборатории. Из локтевой вены с помощью одноразового шприца забирается образец крови в объеме 5–10 мл. Нередко используют специальные вакуумные пробирки, после подсоединения к которым иглы кровь самостоятельно заполняет емкость. Полученный образец маркируется соответствующим образом и отправляется для дальнейшего обследования. Чаще результат исследования известен на следующий день.

Суть методики

Иммуноферментный анализ крови на паразитов и других микроорганизмов – вредителей здоровью организма дает возможность не только установить наличие возбудителей, но и расскажет об их численности в плазме крови пациента. Таким образом, подобное исследование позволяет произвести и качественный и количественный анализ патогенных микроорганизмов, обнаруженных в сывороточном материале.

Уровень концентрации возбудителя в значительной мере оказывает влияние на развитие инфекции и скорость выздоровления, поэтому качественная оценка считается не менее важной, чем количественная. Ей отводится далеко не последняя роль как при лечении детей, так и взрослых

Но как же получается, что ИФА удается распознавать такой обширный диапазон микроорганизмов, которые паразитируют в теле человека и животных, принося вред и снижая качество жизни?

Методика исследования строится на нескольких вариантах (прямой и непрямой – конкурентный и неконкурентный) выполнения поставленных задач, причем каждый из них предназначен для определенных целей. Такой подход позволяет производить целенаправленный поиск, и в кратчайшие сроки выявлять причину той или иной патологии. Для обнаружения Ig разных классовых категорий применяется 96-луночный планшет (полистироловая панель), а в его лунках расположены сорбированные рекомбинантные белки. Они исполняют роль антигенов, и на начальном этапе находятся в твердой фазе.

При попадании в лунку с плазмой крови, антигены или антитела идентифицируют в связи со своей направленностью объект, и формируют комплекс (АГ – АТ). Данное образование закрепляется ферментным соединением (коньюгатом), который впоследствии проявится измененным окрашиванием лунки. ИФА производится на специфических тест-системах, изготовленных в профильных лабораториях и укомплектованных полным набором реагентов.

Данный анализ можно выполнять на вошерах – промывных аппаратах и считывающих спектрофометров, но они требуют ручного труда. Безусловно, лаборанту в несколько раз удобнее и быстрее осуществлять все манипуляции на полностью автоматизированных приборах. При их использовании сотрудники лаборатории освобождаются от большого объема монотонной деятельности – промывания, закапывания и остальной рутины, но не все лечебные учреждения могут себе позволить такую дорогостоящую аппаратуру

Поэтому многие больницы и диагностические заведения продолжают осуществлять ИФА по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация материалов исследования исключительно компетенция специалиста лабораторной диагностики – только ему могут рассказать результаты о специфике и тонкостях протекания заболевания. При этом врач должен обязательно учесть возможность получения ложноотрицательных или ложноположительных ответов.

Показания к проведению ИФА-анализа

• Возможное заражение гепатитами B, C, D (дельта) – пожелтение кожи и склер, потемнение мочи, светлый кал, кожный зуд, боль в правом подреберье.
• Подозрение на инфицирование туберкулезом и ВИЧ – кашель, боли в костях, повышение температуры, ухудшение общего состояния, похудение, склонность к инфекциям, увеличение лимфоузлов, нарушение работы кишечника, появление крови в мокроте.
• Признаки сифилиса – появление язвы (твердого шанкра) на любой части тела, увеличение лимфоузлов, различные высыпания на коже и слизистой. Исследование позволяет обнаружить не только свежие, но и запущенные случаи болезни.
• Подозрение на заражение различными венерическими инфекциями. ИФА-анализ нужно сдать при возникновении боли во время мочеиспускания, выделений из уретры половых путей, различных высыпаний в интимной зоне, неприятного запаха мочи, появлении в урине мути и гноя. Методика выявляет антитела к различным возбудителям половых инфекций – хламидиям, микоплазмам, уреаплазмам.
• Подозрение на кандидоз (молочницу), проявляющийся творожистым налетом в интимной зоне, во рту, в паховых складках, области заднего прохода, а также белыми выделениями из половых путей, напоминающими свернувшееся молоко. Иммуноферментный анализ крови позволяет выявить не только наличие возбудителя, но и его концентрацию.
• Возможное заражение паразитами, проявляющееся нарушением работы кишечника, тошнотой, рвотой, анемией (малокровием), отеками, болями в мышцах, слабостью, головной болью. Метод выявляет паразитирование простейшими – лямблиями и гельминтами (глистами) – трематодами, трихинеллами, эхинококком. ИФА намного информативнее анализа кала, поскольку выявляет даже возбудителей, находящихся вне кишечника.
• Подготовка к беременности. Перед ее планированием нужно обследоваться на TORCH-инфекции (токсоплазмоз, краснуху, цитомегаловирус), приводящие к аномалиям развития плода. Обоим родителям нужно также сдать кровь на гепатит и половые инфекции. Анализы на TORCH-инфекции сдают повторно на 12 неделе беременности.
• Планируемое стационарное лечение, подготовка к оперативным вмешательствам, гинекологическим, хирургическим и урологическим процедурам. В этом случае ИФА-анализы сдаются непосредственно перед госпитализацией или операцией, поскольку срок их действия ограничивается одним-двумя месяцами.
• Донорство – всех потенциальных доноров крови и её элементов, яйцеклеток, сперматозоидов, костного мозга обязательно обследуют на сифилис, гепатит и ВИЧ.
• Прохождение различных медкомиссий, в которые, как правило, входят ИФА-анализы на сифилис, гепатиты, вирусы ВИЧ типа 1 и 2. Многие комиссии также включают исследования крови на туберкулез и ЗППП.

Врач смотрит снимок

Тошнота

Увеличение лимфоузлов

Расшифровка результатов

Расшифровка результатов анализов на иммуноферменты определяется количественными качественными показателями.

При качественном определении результат может быть положительным (знак «+»), что означает возможное протекание патологического процесса либо отрицательным (знак «-«), что свидетельствует об отсутствии инфекционных возбудителей.

Количественное определение направлено на выявление активности антител и их классов (IgM, IgG, IgA):

• IgM (+) – в организме протекает острый инфекционный процесс;
• IgM (-) – отсутствие конкретного возбудителя либо переход инфекционного процесса в хроническую стадию;
• IgM (+) и IgA (+) – одновременное присутствие таких положительных результатов говорит об острой фазе заболевания;
• IgA (+) и IgM (-) – скрыто протекающая либо хроническая инфекция;
• IgG (+) – перетекание заболевания в хроническую стадию либо переход к выздоровлению (выработан иммунитет к инфекционному агенту);
• IgG (-) и IgM (+)- недавнее инфицирование и острое течение патологического процесса;
• IgM (+) и IgG (+) – давнее заражение и обострение инфекционного процесса.

Количественные значения возможны в разных интерпретациях и несут большую информационную нагрузку, поэтому трактовать их может только высококвалифицированный специалист. Самостоятельная оценка таких данных невозможна.

С помощью данного анализа можно поставить точный диагноз и добиться своевременного и эффективного лечения заболевания

Иммуноферментный анализ позволяет наиболее максимально и информативно обследовать пациента, что помогает сократить время диагностики, а значит быстрей начать необходимое лечение и ускорить процесс выздоровления.

Показания к применению

Полный перечень показаний к проведению ифа-теста весьма широк, т.к. включает в себя почти все отрасли медицины. В частной медицинской практике иммуноферментный анализ чаще всего назначается врачом для получения более развернутой картины патологии, протекающей в организме.

Для каких целей чаще всего применяют ИФА-тест:

• При поиске антигенов определенных патологий;
• Для выявления вируса гепатита;
• При обследовании на наличие аутоиммунных расстройств;
• Для определения гормонального статуса;
• При исследовании на наличие онкомаркеров.

При проведении терапии имеющегося заболевания ифа-тест помогает увидеть динамику процесса излечения и при необходимости внести корректировки в стратегию лечения.

Какие заболевания выявляет ифа-тест:

• Инфекционные заболевания, которые были переданы половым путем: микоплазмоз, хламидиоз, трихомониаз, сифилис, уреаплазмоз;
• Вирусный гепатит;
• ВИЧ-инфекции;
• Паразитарные инвазии;
• Хронические и острые инфекции;
• Онкологии;
• Кишечные инфекции;
• Хеликобактериоз;
• Герпес;
• Цитомегаловирус;
• Аллергические реакции.

ИФА-анализ может проводиться при множестве патологий, но назначать такое исследование имеет право только врач. Иногда врач предлагает пройти иммуноферментное исследование несколько раз – для того, чтобы пронаблюдать происходящие в организме изменения в течение болезни.

Исследование актуально для выявления аутоиммунных заболеваний, онкологических маркеров, а также причин бесплодия

Каким образом используется иммуноферментный анализ методом ИФА

Будет большой ошибкой перепутать способ анализа ИФА с методом зондирования и последующего изучения кала. Последние проводятся при помощи методов на микроскопическом уровне, когда берется сданный пациентом образец кала, либо же он отбирается у потенциального больного непосредственно в медицинском учреждении. В образце пытаются обнаружить глистные инвазии и другие компоненты, так или иначе связанные с жизнедеятельность паразитов. Изучаются не только микроскопические паразитирующие организмы, но и их остатки, их яйца и личинки.

Расшифровка ИФА может не дать вам полного понятия проблемы, поэтому лучше всего проконсультироваться с врачом или лаборантом.Также ошибочно полагать, что данный способ актуален лишь в том случае, если гельминты паразитируют в кишечнике. Диагностике подвергаются и многие другие органы – паразиты могут жить в двенадцатиперстной кишке, желчевыводящих путях, печени и даже в поджелудочной железе.

Правда, это более сложные случаи, поэтому качество подобного анализа будет сильно зависеть от работников лаборатории, выполняющей тестирование. Особенности технологии и отличие ее от старых лабораторных исследований:

• теперь вместо пробы кала используется кровь, для определения наличия гельминтов;
• изучение пробы проводится в лаборатории очень быстро, уже на следующий день можно получить полную информацию;
• стоимость лабораторного исследования недорогое, так как теология очень проста;
• анализ крови на гельминтов дает высокие показатели точности.

Актуальность и правдоподобность результатов теста прямопропорциональны квалификации медицинского персонала, технической оснащенности лаборатории, а также отсутствия какой-либо халатности или невнимательности у медиков. Однако, даже самый внимательный и ответственный лаборант испытает огромные трудности, если паразит присутствует в организме в его минимальной популяции, либо же выполнил кладку непосредственно в момент проведения тестирования.

Для чего нужен ИФА-анализ

Тест на ИФА является наиболее информативным видом исследования, поскольку при его проведении максимально учитываются исходные данные пациента (общее состояние, динамика и стадия заболевания, эффективность проводимой терапии, др.), что является важным для составления верной схемы лечения.

Благодаря высокой информативности теста можно достаточно быстро вылечить практически любые серьезные заболевания, связанные с нарушениями иммунной системы.

Тест на иммуноферменты назначают для диагностирования болезней, передающихся при половых контактах, онкологических и инфекционных процессов, расстройств в работе репродуктивной и эндокринной системе, иммунодефицитных и аутоиммунных заболеваний, для определения аллергенов, а в некоторых случаях – для оценки риска развития некоторых патологий почек и сердечно-сосудистой системы.

При беременности ИФА-исследование назначается для выявления нарушений развития плода и контроля над ними. Проведение такого теста позволяет контролировать уровень в крови антител, которые способны спровоцировать у плода неврологические расстройства, могущие негативным образом повлиять на ход беременности.

Преимущества ИФА-теста:

• Высокий уровень точности полученных данных;
• Возможность диагностики патологии в инкубационный период (в первые же дни после заражения);
• Автоматизация процесса, что позволяет исключить погрешность исполнителя;
• Чувствительность к возбудителям (даже при минимальном присутствии антигена в крови);
• Точная информация о стадии патологии и эффективности выбранной методики лечения;
• Безболезненность процедуры;
• Быстрота получения результатов.

Однако, при проведении ифа-теста невозможно конкретизировать возбудителя заболевания – то есть, врач заранее должен иметь предварительный диагноз и четко знать, что ищет. Назначать тест с намерением просто угадать диагноз – нет смысла, анализ покажет иммунный ответ организма на присутствие возбудителя, но не укажет его конкретный вид.

При проведении ифа-теста возможен ложноположительный результат, но возникает он в редких случаях. Ложные показатели могут быть связаны с состоянием пациента (беременность), одновременным присутствием нескольких хронических заболеваний, приемом в период исследования некоторых лекарственных препаратов или серьезными нарушениями обменных процессов в организме пациента.

ИФА — крайне сложный и точный анализ, поэтому интерпретацией результатов должен заниматься только высококвалифицированный врач

Также к недостаткам ИФА-анализа относят высокую стоимость процедуры, что связано с достаточно дорогостоящим оборудованием, необходимым для его проведения, и необходимостью присутствия высококвалифицированных специалистов, занимающихся расшифровкой результатов.

ИФА анализ крови

ИФА (иммуноферментный анализ) производится в лабораторных условиях для того, чтобы выявить степень защиты организма, а именно его функций. В ходе такой процедуры специалист может определить свойства и количество клеток, а также наличие антител в организме. Такое тестирование может быть проведено для диагностирования аутоиммунных, гематологических или инфекционных заболеваний.

Чтобы провести такое исследование крови ИФА, должны быть определенные показания для этого. Их обычно выявляет врач, который и проводит лечение.

Кровь может браться на анализ в таких случаях:

1. Для диагностирования инфекций, которые могут передаваться половым путем (сифилис, хламидиоз и прочие).
2. Для диагностирования наличия вирусных инфекций (гепатит, герпес и прочие).
3. Для выявления количества и качества гормонов в теле.
4. Для диагностирования онкологического заболевания.
5. Для определения уровня иммунодефицита.
6. Для диагностирования организма на наличие тех или иных заболеваний при пересадке органов.
7. Для оценки эффективности проводимой терапии.

В основе данного принципа анализа лежит то, что при помощи его можно выявить в организме иммуноглобулины (белковые антитела). Такие тела вырабатываются организмом, а именно иммунной системой, когда в тело попадает инфекция. Такие вещества, которые вырабатывает организм, способны связываться с возбудителями инфекции и нейтрализовать их в процессе этого.

Классификация антител, которые борются с инфекцией в организме

Иммуноглобулины имеют особую характеристику. Это специфичность, чем и отличаются от других антител. Благодаря такой своей способности они могут связываться с другими антигенами, образовывая комплексное антитело. Именно при анализе ИФА и можно выявить такие тела в крови. В настоящее время специалисты различают иммуноглобулины пяти типов.

Обычно же их делят на три класса:

1. А.
2. М.
3. G.

Такие антитела могут накапливаться в организме человека при попадании в него инфекции. При этом появляются они в разное время после инфицирования.

Самые первые, которые появляются в крови после инфицирования, это антитела класса М. Они образуются на пятый день после заражения. Находятся в теле они 20-24 дня, а потом исчезают. Такие антитела могут указывать на то, что инфекция в организме острая или уже перешла в хроническую стадию. Это дает врачу информацию о том, что надо незамедлительно начинать процесс лечения.

Через 20-25 дней после появления заражения появляются тела G. Внутри человека они могут находиться на протяжении двух лет. Если при сдаче тестов два раза подряд будут выявлены эти антитела в крови (между анализами промежуток составляет 2-3 недели), то это говорит врачу, что инфекция в организме протекает повторно. То есть, человек еще раз заразился подобной инфекцией.

Тела класса А можно обнаружить в организме через 2-3 недели после инфицирования или обострения болезни. Тут следует отметить, что только 20% этих тел могут находиться в крови. Все остальные же в это время будут располагаться на слизистых. Полностью исчезают такие антитела через 3-7 недель после того, как они уничтожат тела инфекции. Если их при проведении анализа не будет обнаружено в теле, то это говорит о том, что инфекции нет в организме. Если на протяжении определенного срока в организме еще будут обнаружены данные антитела, то это может сказать о том, что заболевание стало уже хроническое.

Чтобы провести тестирование ИФА, берется кровь у пациента. Есть также возможность проводить данные исследования и при взятии другого материала, например, околоплодных вод или спинномозгового вещества. Кровь обычно берется для тестирования из вены.

Специалисты советуют данные тесты сдавать на голодный желудок. После употребления еды должно пройти 10-12 часов. Также, если клиент употребляет какие-либо лекарственные препараты при сдаче анализа ИФА, то он должен сообщить об этом своему лечащему врачу. Это может повлиять на точность тестирования. На достоверность тестирования влияет спиртное или наркотики. Их не следует употреблять на протяжении 3-5 дней перед сдачей анализов.

После проведения исследования сданного материала врач ставит диагноз. Он может быть положительным (+) или отрицательным (-). Такие оценки ставятся по каждому классу иммуноглобулинов.